流式B细胞抗体开发平台
流式B细胞抗体开发技术是根据每一个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,从免疫动物组织或外周血中分离抗原特异性B细胞并培养。再经体外测定阳性克隆所分泌抗体性能后,择优扩增其抗体可变区基因,最后进行抗体的重组表达和验证。
华槃生物(HOPREN Bioscience)从经免疫动物(小鼠/大鼠/兔/鸡/羊驼/鲨鱼/人等)中用流式分选抗原特异性B细胞群,随后直接扩培单个B细胞。扩培过程中同时进行体外测定阳性克隆所分泌抗体性能后,择优扩增其IgG重链和轻链可变区基因,最后通过哺乳动物稳定细胞株表达平台进行表达并获得具有生物活性的单克隆抗体。
较短的交付周期
最快8周交付
多种属来源抗体
小鼠/大鼠/兔/鸡/羊驼/鲨鱼/人等
(无种属限制)
实际应用性好
结合抗体用途进行筛选
多种功能性验证平台服务
可改造性强
直接获取抗体基因序列
珍稀抗体保有率高
多特异性抗体改造
抗体标记/偶联服务
服务内容

动物免疫
小鼠快免15天
兔子快免33天
单B细胞分选、培养和抗体性能测定
抗原特异性单B细胞分选
上清Elisa、FACS介入筛选
交付内容
上清的结合检测数据结果
目的基因扩增及载体重构
阳性克隆裂解
RT-PCR和载体重构
交付内容
测序和重构:交付10-20个Unique序列
抗体工程化表达
稳定细胞株构建
抗体表达及纯化
交付内容
经验证的1-2株最优抗体的稳定细胞株(各提供2管冻存细胞)
交付各0.5-1mg纯化样品
10~100mg或更多抗体蛋白(可选)
验证和交付
根据客户要求进行功能验证(可选)
QC分析(SDS-PAGE, UV等)
交付内容
质量检验报告(CoA)
附加服务
为满足客户的特定需求,华槃生物还提供更加广泛的附加服务,如下所示:
功能性抗原验证服务
蛋白复合物制备
指定细胞定制表达 (最接近天然构象)
膜蛋白纳米盘制备服务
抗体配对
单克隆稳定细胞株制备 (高表达)
动物生物反应器服务
多抗制备
蛋白标记服务
淋巴细胞功能性实验服务
生物效应和功能评价服务
药物开发及药理学检测服务
分子生物学实验服务
体外细胞实验服务
动物实验服务
服务流程
抗体开发涵盖范围
常见问题解答
- 什么是流式B细胞抗体开发技术?
流式B细胞抗体开发技术是根据每一个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,从经免疫动物的组织或外周血中分离抗原特异性B细胞,获得其中具备优异性能的抗体的序列并进行抗体工程化表达,最终得到高性能抗体的技术。
- 华槃生物的流式B细胞抗体开发平台具备哪些优势?
华槃生物(HOPREN Bioscience)从经免疫动物组织或外周血中以流式分选抗原特异性B细胞群,随后直接扩培单个B细胞,扩培过程中测定阳性克隆所分泌抗体性能。随后择优扩增其IgG重链和轻链可变区基因,最后通过稳定细胞株表达平台进行工程化表达并获得具有生物活性的高性能的单克隆抗体,其优势在于:
1.保证了轻重链的天然配对。避免了文库多轮重组时 “越筛越少、越筛越杂、味同鸡肋”的尴尬处境。
2.无种属来源限制,可直接得到如小鼠/大鼠/兔/鸡/羊驼/鲨鱼/人源等的抗体。无抗体骨架适配问题。
3.不受转化效率的限制,阳性率高。修饰不受限,珍稀抗体保有率高。
4.抗体经亲和力成熟,表达前验证手段丰富。能获得高抗原特异性、高亲和性,或具备功能特性的抗体。
5.较短的交付周期,直接获得序列,经稳转表达后不丢失。
最终抗体以稳定细胞株表达交付。批次生产差异小。
- 华槃生物如何进行抗体筛选?
华槃生物从客户角度出发,结合抗体具体用途进行抗体筛选,最大程度保障筛选出抗体的可应用性。比如:
1.选择适当的抗原进行充分的免疫,如使用更接近天然构象的、具备充足翻译后修饰的、具备功能性的高纯度抗原进行充分免疫。使免疫动物体内的分泌优质抗体的B细胞群经过充分的亲和力成熟和扩大过程。
2.根据具体用途,选择适当的方法进行筛选。华槃生物提供多种功能性验证平台服务,优中选优,最大程度使抗体达到应用需求。如靶点阻断力排序、位点竞争实验、体外淋巴细胞功能性实验、各类动物实验、小样标记/偶联平台、加速稳定性测试平台等,满足抗体在不同应用场景下需求。
- 若想做流式B细胞抗体开发,需提供哪些信息?
以下信息四选一提供即可,华槃生物技术人员会根据客户要求进行风险评估和制定策略。
1.客户需提供免疫所需的抗原(>90%)。
2.客户提供目标蛋白的序列(希望表达的目标蛋白的区段信息)。
3.客户提供编码目标蛋白的核苷酸序列。
4.客户提供免疫原的具体名称。
立即咨询真核蛋白表达服务