稳定细胞株表达平台
哺乳动物细胞具有高度复杂的蛋白折叠和翻译后修饰机制，其表达的重组蛋白以具备正确折叠和修饰、且最接近体内的天然形式等特点，成为现代重组蛋白生物技术的重要组成部分。
华槃生物(HOPREN Bioscience) 围绕哺乳动物表达系统，自主研发稳定细胞株快速表达平台、高表达单克隆稳定细胞株平台，涵盖以定向驯化的293或CHO细胞为代表的多种贴壁或悬浮细胞系，结合成熟的纯化服务平台，帮助客户获得最接近天然构象的高活性重组蛋白。
快速的交付周期
最快3周交付稳定细胞株
最快6周内交付蛋白
最高的阳性率
稳定细胞株阳性率≈100%
单克隆稳定细胞株性率100%
最接近天然构象
单克隆稳定细胞株可指定细胞种类
(如3T3、HepG2、EAC、WRC256等)
通用于分泌蛋白/全长膜蛋白等
服务内容
基因合成、载体构建和质粒生产
您需提供：宿主细胞信息、目的基因NM号或序列。
目的基因构建入华槃优化的高效表达载体
质粒测序
质粒制备
交付内容
测序报告
慢病毒包装及生产
采用慢病毒系统构建
慢病毒转导及稳定株筛选
慢病毒感染细胞
筛选稳定细胞株
慢病毒转导及多克隆筛选
慢病毒感染特定细胞
单个细胞克隆筛选及扩增
稳定细胞株鉴定
FACS或WB鉴定
细胞库建立
交付内容
1株稳定细胞株
(提供2管冻存细胞)
单克隆稳转系鉴定
FACS或WB鉴定
细胞库建立
交付内容
1~3株高表达单克隆稳定细胞株 (每株提供2管冻存细胞)
蛋白表达和纯化
(可选)
蛋白表达及纯化
QC分析(SDS-PAGE, UV等)
交付内容
0.1~0.5mg纯化蛋白样品
10~100mg或更多蛋白(可选)
质量检验报告(CoA)
附加服务
为满足客户的特定需求，华槃生物还提供更加广泛的附加服务，如下所示：
单克隆稳定细胞株制备 (高表达)
指定细胞定制表达 (最接近天然构象)
动物生物反应器服务
膜蛋白纳米盘制备服务
标签去除服务
蛋白标记服务
蛋白复合物制备
生物效应和功能评价服务
药物开发及药理学检测服务
服务流程
双方沟通确定实验需求及服务价格
签订技术服务合同并收取预付款
稳定细胞株构建和筛选
提供稳定细胞株
样品表达和纯化(可选)
蛋白大量表达和纯化(可选)
常见问题解答
- 什么情况下建议选择哺乳动物表达系统？
哺乳动物表达系统能够进行蛋白质折叠和完整的翻译后修饰（例如糖基化、磷酸化等）。哺乳动物细胞表达的重组蛋白，其构象严谨性(尤其空间结构)和生物学功能大多接近于天然蛋白。当目的蛋白属于这种情况，即推荐使用哺乳动物表达系统。
- 为什么要构建稳定细胞株？
瞬转系统为一次性使用，产物中常残留转染试剂来源的毒性成分和原核来源的内毒素成分，其表达量较低、性状不稳定、无法稳定传代、且重组蛋白表达的批间差异大。
稳定细胞株能够稳定传代且性状不退化，其产物无转染残留的毒性成分，表达量高且批间差异小。尤其在成药用途的重组蛋白和抗体、难以转染的细胞等方面具有显著优势。但制备时间较长。
华槃生物技术团队攻克稳定细胞株制备难关，稳定细胞株最快3周交付，且具备优秀的性能。让真核表达比原核更简单！
- 如何选择稳定细胞株和单克隆稳定细胞株？
只需要拿到蛋白/抗体的，选择稳定细胞株。
成药用途的重组蛋白和抗体、需要指定细胞尤其是难以转染细胞表达的(最接近内源性表达和天然构象)、需制备膜蛋白纳米碟、或追求最高单位表达量的，需要单克隆稳定细胞株。
- 华槃生物的稳定细胞株构建服务的优势在哪里？
稳定细胞pool常含有较高比例的阴性细胞，在传代过程中阴性细胞、低表达阳性细胞、高表达阳性细胞因面临的生存压力不同，阴性细胞迅速占据优势，阳性细胞比例迅速减少、最终丢失。
华槃生物通过独创的稳定细胞株表达平台，得到的稳定细胞株的阳性率接近100%，而高表达单克隆稳定细胞株达到100%，使稳定细胞株性状不丢失。真正意义上让真核表达比原核更简单。
- 稳定细胞株做重组蛋白，能否根据蛋白活性进行克隆筛选？
可以。华槃生物提供“生物效应及功能评价平台服务”，以客户提供的活性检测方法为基础，提供minipool供客户进行活性检测（或由华槃进行活性检测）。符合客户对活性的要求后再进行后续的实验。
- 若想做稳定细胞株，需提供哪些信息？
客户仅需提供目标蛋白的序列信息和希望表达的目标蛋白的区段，华槃生物技术人员会根据客户要求进行表达风险评估和制定表达纯化策略。常见蛋白序列信息来源包括UniProt和NCBI等数据库。客户也可直接提供编码目标蛋白的核苷酸序列。
- 稳定株细胞如何交付？
视具体情况，在客户确认的前提下。采用T25培养瓶发货或干冰运输。
立即咨询真核蛋白表达服务
